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English| 發(fā)布日期：2023-05-24 作者：紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用 瀏覽：2747次 |
UV-Vis已發(fā)現(xiàn)其適用于許多用途和情況，包括但不限于：
1、DNA和RNA分析
快速驗(yàn)證RNA和DNA的純度和濃度是一種特別廣泛的應(yīng)用。下表1中給出了分析中使用的波長及其指示的摘要。在制備DNA或RNA樣品時(shí)，例如用于測(cè)序等下游應(yīng)用時(shí)，通常重要的是要驗(yàn)證其中一個(gè)樣品沒有被其他，或從分離過程中攜帶的蛋白質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)。
260nm/280nm吸光度（260/280）比值可用于揭示核酸樣品中可能存在的污染，如下表2所示。純DNA的260/280比值通常為1.8，而純RNA的比值通常為2.0.純DNA的260/280比值低于RNA，因?yàn)樵赗NA中被尿嘧啶取代的胸腺嘧啶的260/280比值低于尿嘧啶。由于280nm處的吸光度較高，被蛋白質(zhì)污染的樣品會(huì)降低260/280比值。
260nm/230nm吸光度（260/230）比率也可用于檢查DNA和RNA樣品的純度，并可揭示蛋白質(zhì)或化學(xué)污染。蛋白質(zhì)可以吸收230nm的光，從而降低260/230比率并指示DNA和RNA樣品中的蛋白質(zhì)污染。硫氰酸胍和異硫氰酸胍是純化核酸中常用的兩種化合物，在230nm處有強(qiáng)烈吸收，這也會(huì)降低260/230的吸光度比值。
2、藥物分析
UV-Vis光譜最常見的用途之一是在制藥行業(yè)。使用數(shù)學(xué)導(dǎo)數(shù)處理UV-Vis光譜允許解析原始光譜中的重疊吸收峰以識(shí)別單個(gè)藥物化合物。例如，苯佐卡因（一種局部麻醉劑）和金霉素（一種抗生素）可以通過將第一個(gè)數(shù)學(xué)導(dǎo)數(shù)應(yīng)用于吸光度光譜，同時(shí)在商業(yè)獸用粉末制劑中進(jìn)行鑒定。通過為每種化合物構(gòu)建校準(zhǔn)函數(shù)，可以在微克/毫升的濃度范圍內(nèi)同時(shí)定量這兩種物質(zhì)。
3、細(xì)菌培養(yǎng)
紫外可見分光光度計(jì)常用于細(xì)菌培養(yǎng)。OD測(cè)量通常使用600nm的波長快速進(jìn)行，以估計(jì)細(xì)胞濃度并跟蹤生長。600nm是常用和優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈冊(cè)谄渲猩L的細(xì)菌培養(yǎng)基的光學(xué)特性以及避免在需要繼續(xù)實(shí)驗(yàn)的情況下?lián)p壞細(xì)胞。
