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應(yīng) 用
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表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)應(yīng)用于海參中抗生素殘留檢測(cè)

發(fā)布日期:2022-04-28    

抗生素是由微生物(包括細(xì)菌、真菌、放線菌屬)或高等動(dòng)植物在生活過程中所產(chǎn)生的具有抗病原體或其它活性的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物,是一類能干擾其它生物細(xì)胞發(fā)育功能的化學(xué)物質(zhì)?,F(xiàn)臨床常用的抗生素大都是由轉(zhuǎn)基因工程菌培養(yǎng)液液中提取物以及用化學(xué)方法合成或半合成的化合物??股卦陴B(yǎng)殖業(yè)找那個(gè)不僅可以促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育還可以幫助動(dòng)物抵御疾病、治療疾病,在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中有著廣泛應(yīng)用。

硝基呋喃類藥物是一種廣譜抗生素,對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌、真菌和原蟲等病原體均有殺滅作用,曾廣泛應(yīng)用于畜禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè),用于治療由大腸桿菌或沙門氏菌所引起的腸炎、疥瘡、赤鰭病、潰瘍病等。但由于硝基呋喃類藥物及其代謝物對(duì)人體有致癌、致畸胎副作用,中國(guó)衛(wèi)生部于2010年3月22日將硝基呋喃類藥物呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林列入可能違法添加的非食用物質(zhì)黑名單。

但因硝基呋喃類藥物的價(jià)格低廉且藥效顯著,在水產(chǎn)養(yǎng)殖中仍常有違法使用的情況,水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物中硝基呋喃類藥物殘留仍不容樂觀。根據(jù)近年來的風(fēng)險(xiǎn)隱患排查結(jié)果,硝基呋喃仍是檢出率最高的違禁藥物之一。

抗生素1.png抗生素2.png抗生素2.png

硝基呋喃類藥物及其代謝物,目前常用的檢測(cè)方法有液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等。此類方法需要配備昂貴的液相色譜儀和液相-質(zhì)譜聯(lián)用儀等儀器,所采用前處理方法對(duì)和儀器操作對(duì)實(shí)驗(yàn)人員也有較高要求,且檢測(cè)耗時(shí)長(zhǎng)、測(cè)試成本高,因此限制了色譜法與質(zhì)譜法在一線監(jiān)管現(xiàn)場(chǎng)的應(yīng)用。

表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)克服了傳統(tǒng)拉曼光譜靈敏度低的缺點(diǎn),能夠?qū)崿F(xiàn)痕量物質(zhì)的檢測(cè),同時(shí)還具有樣品前處理簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快、易實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。因此,目前已廣泛應(yīng)用于食品快檢、環(huán)境監(jiān)測(cè)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,在食品中農(nóng)獸藥殘留、限用或禁用添加劑中已展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。

如海儀器基于拉曼光譜技術(shù),結(jié)合自身在拉曼光譜儀設(shè)備和光譜軟件研發(fā)優(yōu)勢(shì)推出了拉曼光譜抗生素速測(cè)試劑盒。其中呋喃速測(cè)試劑盒針對(duì)水產(chǎn)品中呋喃類藥物設(shè)計(jì),該方案整體檢測(cè)耗時(shí)在30min內(nèi),單次檢測(cè)成本不超過15塊,能夠高效、快捷的檢出養(yǎng)殖水及各類水產(chǎn)品中呋喃類藥物殘留。

應(yīng)用案例

(1)實(shí)驗(yàn)對(duì)象

檢測(cè)基質(zhì):池塘養(yǎng)殖水海參;

檢測(cè)項(xiàng)目:呋喃唑酮、呋喃妥因;

注:池塘水和海參已按照GB 31656.13-2021采用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行測(cè)試不含呋喃類藥物。

(2)實(shí)驗(yàn)方案

本次實(shí)驗(yàn)開始前先采用液相-質(zhì)譜法對(duì)養(yǎng)殖水和海參進(jìn)行檢測(cè),確認(rèn)兩種基質(zhì)樣品中不含有呋喃類藥物殘留。采用標(biāo)準(zhǔn)加標(biāo)的方式配置待測(cè)樣本如下表,詳細(xì)實(shí)驗(yàn)信息見下表。

實(shí)驗(yàn)編號(hào)

實(shí)驗(yàn)樣品

添加藥物

添加濃度(mg/kg

1

養(yǎng)殖水

呋喃妥因

0.1

2

呋喃唑酮

0.1

3

海參

呋喃妥因

1

4

呋喃唑酮

1

*注:養(yǎng)殖水和海參經(jīng)過確認(rèn)無呋喃妥因和呋喃妥酮?dú)埩簟?/span>

(3)測(cè)試方法

本次實(shí)驗(yàn)采用如海自研呋喃拉曼速測(cè)試劑盒結(jié)合前處理一體機(jī)對(duì)樣品進(jìn)行前處理,箱體式拉曼光譜儀采集光譜數(shù)據(jù),智檢E+軟件進(jìn)行識(shí)別。

樣品前處理過程:稱取1g實(shí)驗(yàn)樣品,加入提取試劑,充分振蕩提取。提取后加入凈化試劑,凈化后進(jìn)行上機(jī)檢測(cè),詳細(xì)測(cè)試過程請(qǐng)參考如海自研呋喃拉曼速測(cè)試劑盒說明書。

(4)儀器與耗材

產(chǎn)品

型號(hào)

數(shù)量

箱體式拉曼光譜儀

IRS1000

1

前處理一體箱

RFSC-1000

1

比色皿

CVT-721

6

呋喃拉曼快速檢測(cè)試劑盒

/

1

(5)測(cè)試結(jié)果

本次實(shí)驗(yàn)共分為6組,實(shí)驗(yàn)1和2分別是對(duì)未添加呋喃藥物的養(yǎng)殖水和海參進(jìn)行測(cè)試,測(cè)試譜圖中也未發(fā)現(xiàn)呋喃妥因和呋喃唑酮特征位移,測(cè)試結(jié)果與液相-質(zhì)譜法相吻合,證明兩種實(shí)驗(yàn)對(duì)象中不含呋喃類藥物殘留。實(shí)驗(yàn)3和4是在養(yǎng)殖水中添加呋喃唑酮和呋喃妥因的測(cè)試結(jié)果,在實(shí)驗(yàn)3測(cè)試譜圖中可以明顯發(fā)現(xiàn)810、1023、1340、1604cm-1等拉曼特征位移,表明添加了0.1mg/kg的呋喃妥因可以通過拉曼光譜法檢出;根據(jù)實(shí)驗(yàn)4的拉曼測(cè)試譜圖中784、1038、1190、1339、1453cm-1等拉曼特征位移也可以看出養(yǎng)殖水中添加的呋喃唑酮已被檢出。

抗生素3.png

實(shí)驗(yàn)5和6分別是在海參中添加了呋喃唑酮和呋喃妥因的測(cè)試結(jié)果,與養(yǎng)殖水測(cè)試結(jié)果類似的,兩種藥物在海參中也可以通過拉曼光譜法檢出。

抗生素4.png

實(shí)驗(yàn)編號(hào)

實(shí)驗(yàn)樣品

添加藥物

添加濃度(mg/kg

是否檢出

1

養(yǎng)殖水

--

--

2

海參

--

--

3

養(yǎng)殖水

呋喃妥因

0.1

4

呋喃唑酮

0.1

5

海參

呋喃妥因

1

6

呋喃唑酮

1

結(jié)論

在本次呋喃類藥物測(cè)實(shí)驗(yàn)中,小編利用如海自研箱體式拉曼光譜儀結(jié)合呋喃拉曼速測(cè)試劑盒對(duì)添加了呋喃類藥物的養(yǎng)殖水和海參進(jìn)行測(cè)試,添加在兩種樣品中的呋喃唑酮和呋喃妥因均可被準(zhǔn)確檢出。