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English| 發(fā)布日期：2019-03-10 |
引言
羅丹明B(Rhodamine B)又稱玫瑰紅B,或堿性玫瑰精，俗稱花粉紅，是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。實驗證明羅丹明B會致癌，現(xiàn)在已不允許用作食品染色。但是不法商販會利用消費者喜歡好賣相的心理，往花椒、辣椒、紅辣椒油、紅油豆制品等食品中添加羅丹明B來提高其紅艷度。
經(jīng)研究證明羅丹明B會直接危害到人體健康，具有潛在的致癌、致突變性和心臟毒性，是我國08年第一批列入《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單》中的一種，是被監(jiān)管部門嚴厲監(jiān)察打擊的。想要用肉眼分辯出羅丹明B其實很難，常用檢測方式主要有GC和GC-MS聯(lián)用法。
此檢測方式需要大型儀器設備,價格昂貴。 使用拉曼光譜檢測方式在分析化學等很多領域中得到了很好的發(fā)展和應用。結(jié)合表面增強拉曼技術可以顯著提供高靈敏度,在食品安全和材料科學等領域已經(jīng)得到了廣泛應用。本文中通過拉曼光譜法只需要簡單的樣品前處理，可以在十幾分鐘內(nèi)得到食品中是否含有非法添加羅丹明B的檢測結(jié)果。
實驗部分
1. 實驗試劑
工業(yè)色素羅丹明B1000ppm(mg/kg)、去離子水（二次蒸餾水）、增強試劑、促凝劑、乙腈、辣椒粉、乙腈
2. 實驗儀器
EVA3000Plus、拉曼液體測量支架、超聲波萃取機、離心機（1萬轉(zhuǎn)）、移液槍（1-1000ul,1-100ul，1-200ul規(guī)格）
由上海如海光電科技有限公司生產(chǎn)的手持式拉曼光譜儀EVA3000Plus
儀器參數(shù)
3. 實驗方法
測試標準樣品：
step1、使用移液槍取1ul的羅丹明B1000ppm，取999ul的二次水，獲得1ppm的羅丹明B標準樣品
step2、使用移液槍取試劑A（金膠）500ul至試劑瓶
step3、使用移液槍取羅丹明標準樣品50ul至試劑瓶
step4、使用移液槍取試劑B（促凝劑）100ul至試劑瓶，搖勻
step5、測試拉曼信號，設置200mw激光器，積分時間5秒中
注意事項：測試前需要搖勻，并在2-3分鐘內(nèi)完成樣品測試
測試實際樣品：
step1、取1g辣椒粉
step2、使用移液槍取50ppm羅丹明B100ul
step3、使用移液槍取100ul的乙腈稀釋（得到濃度為5ppm的陽性樣品）
step4、取3ml乙腈，搖勻后，超聲10分鐘，取上清液500ul
step5、取試劑A 100ul，離心機離心2分鐘，液固分離，取上清液
step6、使用移液槍取試劑A（金膠）500ul至試劑瓶
step7、使用移液槍取試劑樣本樣品50ul至試劑瓶
step8、使用移液槍取試劑B（促凝劑）100ul至試劑瓶，搖勻
step9、測試拉曼信號，設置200mw激光器，積分時間5
結(jié)果與討論
實驗測試了1ppm的標準樣品和5ppm的實際樣品數(shù)據(jù)如下圖所示，得到了羅丹明的表面增強后的拉曼光譜。下圖為辣椒實際樣品和標準樣品的拉曼表面增強拉曼光譜（光譜平滑、基線扣除、歸一化數(shù)據(jù)處理）：
得到辣椒實際樣品和標準樣品的拉曼表面增強拉曼光譜的相似度為0.8868，從特征峰來看，羅丹明的特征峰被檢出，判斷為陽性樣品。
